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Buffer GBT, 100 ml质粒相关溶液

  • 型   号:PS015
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上海古朵生物供应Buffer GBT, 100 ml质粒相关溶液上海古朵生物是一家集研发、销售为一体的高新技术生物企业,公司专注于生命科学和生物技术领域,专业提供分子生物学、免疫学、生命科学基础研究以及临床检测等诸多领域的试剂、耗材、仪器等各类产品及生物技术服务。

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上海古朵生物供应Buffer GBT, 100 ml质粒相关溶液上海古朵生物是一家集研发、销售为一体的高新技术生物企业,公司专注于生命科学和生物技术领域,专业提供分子生物学、免疫学、生命科学基础研究以及临床检测等诸多领域的试剂、耗材、仪器等各类产品及生物技术服务。

 

 

抽提窍门
1:加溶液II(裂解液)后,操作一定要温和,剧烈混合会导致基因组DNA污染。 [5]
2:洗脱时60℃温育(Ellution Buffer)洗脱缓冲液或去离子水效果更好。
3:若质粒提取含量低,可增加菌液样或换用ArtMedia Plasmid Culture,其比LB培养基质粒得量高
4:菌体应彻底悬浮 , 如果没有彻底悬浮菌体,则残留的菌体团块在溶液 II 加入后,变成难以完全裂解的团块。这个团块在溶液 III 加入后,会有一部分蛋白质继续存在于溶液中,成为蛋白质残留的最大根源。
5:加入溶液 II 后,混匀,体系最hao能立即变得清澈。体系如果变得清澈了,马上加入溶液 III 中和。
6:中和的操作 ,在 1.5ml 离心管中加入溶液 III 后,先颠倒两次,使管底朝上,用指头弹击管底数次,再颠倒混匀。效果非常好。

 

Buffer GBT, 100 ml质粒相关溶液  操作步骤
Ⅰ.使用质粒提取试剂盒提取质粒时请参考具体试剂盒的操作说明。如Omega公司的E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I, Q(capless) Spin [4]  (质粒提取盒)。
Ⅱ.碱裂解手提法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下:
1:接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2mlLB培养基。
2:37℃振荡培养过夜。
3:取1.5ml菌体于Ep管(离心管),以4000rpm离心3min,弃上清液。
4:加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/LEDTApH8.0,25mM/LTris-HClpH8.0)充分混合。
5:加入0.2ml溶液II(0.2mM/LNaOH,1%SDS),轻轻翻转混匀,置于冰浴5min.
6:加入0.15m1预冷溶液III(5mol/LKAc,pH4.8),轻轻翻转混匀,置于冰浴5min.
7:以10,000rpm离心20min,取上清液于另一新Ep管
8:加入等体积的异戊醇,混匀后静置10min.
9:以10,000rpm离心20min,弃上清。
10:用70%乙醇0.5ml洗涤一次,抽干所有液体。
11:待沉淀干燥后,溶于50ulTE缓冲液中(或60℃温育去离子水)

 

订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将shou据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以chuan真、、等形式通知我们。

 

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